U.D. 2.2 COLORAZIONE NEGATIVA CON NIGROSINA

OBIETTIVO:
Osservare la forma di diversi microrganismi utilizzando una colorazione che, non richiedendo fissazione, permette una visione senza artefatti della morfologia batterica.
PRINCIPIO:
La Nigrosina è un colorante acido che non è in grado di penetrare all’interno dei batteri e forma dunque un deposito scuro attorno alle cellule che vengono evidenziate per contrasto.

MATERIALI E STRUMENTI:
MATERIALI BIOLOGICI
Colture microbiche di Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus
MATERIALI CHIMICI
Nigrosina, olio da immersione
VETRERIA, ...
Vetrini portaoggetto, ansa, vaschetta per colorazione, spruzzetta, pinza di legno
STRUMENTI
Microscopio, bunsen
  Nigrosina 2%
 
Aggiungere, in una bottiglia con contagocce, a 2 g di nigrosina 99 ml di acqua distillata. Agitare fino a completa dissoluzione.

 

METODICA

- colorazione

 

 

 Deporre una goccia di nigrosina su un vetrino portaoggetti.

 
Prelevare con un ansa sterile un po’ di materiale batterico da una colonia isolata e miscelarla con la nigrosina.

 

 

 Distendere uniformemente il materiale sul vetrino asciugare all’aria non scaldare e non fissare alla fiamma.

 

- osservazione al microscopio

 

Osservare al microscopio con ogni tipo di obiettivo, procedendo per gradi, dagli obiettivi a secco a piccolo ingrandimento, fino all’obiettivo ad immersione e registrare i risultati ottenuti anche mediante un disegno.