U.D. 6.1 PROTEINA C REATTIVA (Test di agglutinazione indiretta)
| OBIETTIVO: Verificare la presenza di infezioni in atto sul soggetto in esame. |
| PRINCIPIO:
La proteina C reattiva compare nel siero umano in risposta ad una grande varietà di processi infiammatori determinati da infezioni batteriche, nel reumatismo acuto, nell’infarto miocardico, nelle neoplasie maligne. La proteina C ha un forte potere antigene e produce negli animali da laboratorio un anticorpo specifico chiamato “reactive protein antiserum” CRPA. La ricerca della PCR si esegue utilizzando l’antisiero CRPA. |
| MATERIALI
E STRUMENTI: MATERIALI BIOLOGICI Siero, sieri positivo e negativo per PCR MATERIALI CHIMICI Kit PCR |
| VETRERIA,
... Vetrini per agglutinazione a fondo nero
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METODICA
Il
siero in esame deve essere limpido intero e diluito 1/20 (1 parte di siero
e 19 parti di soluzione tampone pH 8,2).
I sieri di controllo positivo e negativo sono prediluiti 1:20 e quindi
pronti all’uso. Agitare prima dell’uso.
Agitare delicatamente prima dell’uso il reattivo al Latex con la proteina C reattiva.
Su un apposito vetrino a fondo nero, diviso in tre settori, si procede come segue:
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I
settore
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II
settore
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III
settore
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1 goccia di siero in esame + |
1 goccia di siero positivo + |
1 goccia di siero negativo + |
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1
goccia di Latex test PCR
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1
goccia di Latex test PCR
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1
goccia di Latex test PCR
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Miscelare con l’apposita bacchetta e quindi roteare delicatamente
il vetrino per 1’ circa.
Il test è positivo con la comparsa di agglutinazione visibile ad occhio nudo trascorsi da 1 a 3 minuti. Agglutinazioni posteriori non sono da considerare.